试管婴儿 - 长沙生殖医学医院

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试管婴儿

  1.体外受精-胚胎移植(IVF-ET)

  该技术是将从母体取出的卵子置于培养皿内,加入经优选诱导获能处理的精子,使精卵在体外受精,并发育成前期胚胎后移植回母体子宫内,经妊娠后分娩婴儿。由于胚胎最初2天在试管内发育,所以又叫试管婴儿技术。

  (1)适应证:1)输卵管堵塞;2)子宫内膜异位伴盆腔内粘连或输卵管异常,使精子在盆腔内被巨嗜细胞吞噬;3)男性轻度少精、弱精症;4)免疫性不孕不育、抗精子抗体阳性;5)原因不明的不孕不育。

  (2)控制性超排卵与卵泡监测:按自然周期取卵,一次周期只能得到一个卵。为了提高妊娠率,目前在IVF-ET技术中,多采用控制性超排卵法,即选用人类促性腺激素,增强与改善卵巢功能,使一次周期能有多个卵泡发育,回收多个卵供受精,以获得较多供移植的胚胎。但超促排卵法有时会有卵泡早熟、质量差的情况。在实施促超排卵过程中,须用阴道B超扫描监测卵泡发育数目、大小,同时监测尿LH及血内激素变化,以便适时调整用药、正确估算取卵时间,并尽量使黄体与内膜功能、妊娠发生及妊娠维持相适应。

  (3)取卵:B超引导下经阴道穿刺取卵术,此操作获卵率高,且此法不需麻醉切口,也不经过膀胱,避免了尿液对精子的伤害。我院专门为患者提供无痛麻醉下取卵术,可减轻患者痛苦。

  (4)体外受精:将取到的卵泡液注入培养皿,肉眼快速辨认含卵细胞及其外周的透明带、放射冠的卵冠丘复合物。在解剖镜下确认有卵细胞存在后,置入CO2培养箱培养4-8h,再根据复合物的形态变化判断选择成熟卵细胞,按比例投入经过洗涤优选已诱导获能的精子,授精后16-18h观察情况,将受精卵移入培养试管/皿内培养。

  (5)胚胎移植:于取卵后48h,胚胎发育成2-8个细胞阶段或在取卵后72h胚胎发育至8-16个细胞时植入子宫。后者较符合自然受精胚胎进入子宫的时间,且在传统体外培养条件下,只有最健康的胚胎才能活到3天,故移植成功率高。一次移植的胚胎数以1-2枚为宜。因为增加胚胎移植数,妊娠率虽呈不按比例的增加,但多胎率也会随之增加。

  (6)胚胎冻融:在IVF-ET中由于促超排卵的应用,一个周期回收的卵泡,经受精发育的胚胎,移植后剩余的胚胎也需要冷冻储存,如移植失败,就可在下个自然周期或HRT周期移植,以提高一次取卵的妊娠率。另外遇到患者因促超排卵引发的卵巢刺激综合征,为了防止妊娠加重病情,也可将胚胎冻存,留待以后移植用。胚胎冻存的机制是,超低温可抑制细胞的新陈代谢,使生命进入休眠状态而保存下来。保存温度为-196℃,保存装置为以液氮作致冷源的液氮罐。

  (7)胚胎移植后监测移植后12-14天验HCG阳性为生化妊娠,显示胚胎植入和发育正常。移植4-6周B超查到胎囊、胚胎为临床妊娠。

  (8)IVF合并症:主要有流产、宫外孕、多胎妊娠、卵巢过度刺激综合征(OHSS)等。

  2.卵泡浆内单精子显微注射(ICSI)

  这一技术是在针对男性精子数量不足,功能异常导致受精障碍所采取的体外受精的微滴法、透明带部分切除法及透明带下授精等方法基础上发展起来的。该技术又称第二代试管婴儿,其操作方法是,不用进行精子的诱导获能处理,只须选择一个形态正常,缓慢运动的精子先予以制动。方法用注射针挤压精子尾部,稍微擦破细胞质膜,诱导精子从擦破点释放精子细胞质体因子激活卵细胞,卵细胞的激活对ICSI的正常受精至关重要,接着按尾先头后的顺序吸精子放入注射针,再通过显微操作,将精子注入卵胞浆内,即完成受精。其他技术环节同于常规IVF-ET。对精道不通的患者可进行附睾穿刺,如吸出物中无精子,则从睾丸取活组织分离精子,或取精细胞激活后使用。适应证为:严重少、弱畸精症、输精管阻塞、先天性双侧输精管缺如以及输精管结扎后子女伤亡,吻合输精管失败或无法吻合者。ICSI是治疗男性不育的有效方法,但目前研究揭示,严重少、弱精症是由染色体镶嵌型异常引起,先天性双侧输精管缺如则常与囊性纤维膜传导基因突变有关,两者都是遗传病,对这两种患者治疗前应告知遗传风险,妊娠后需进行详细产前诊断,有异常须终止妊娠,或在胚胎移植前进行遗传学诊断(PGD),筛选优质胚胎移植。

  3.胚胎植入前遗传学诊断(PGD)

  此法也称第三代试管婴儿,指在IVF-ET的胚胎移植前,取胚胎的遗传物质进行分析,诊断是否有异常,筛选健康胚胎移植,防止遗传病传递的方法。检测物质取4-8个细胞期胚胎的1个细胞或受精前后的卵第一、二极体。取样不影响胚胎发育。检测用单细胞DNA分析法,一是聚合酶链反应(PCR),检测男女性别和单基因遗传病;另一种是荧光原位杂交(FISH),检测性别和染色体病。开初的PGD都是用PCR或FISH检测性别,选女性胚胎移植,帮助有风险生育血友病A、进行性肌营养不良等X连锁遗传病后代的夫妇妊娠分娩出一正常女婴。但按遗传规律,此法无疑否定健康男孩的出生,而允许携带者女孩繁衍,并不能切断致病基因的传递。从理论上讲,凡能诊断的遗传病,应该都能通过PGD防止其传递,但限于目前的技术条件,PGD的适应证还有一定的局限。优生是世界共同关注的问题,随着分子生物技术的发展和更多遗传病基因被确定,相信一些准确、安全的遗传诊断技术会不断出现,PGD技术会日趋完善,更好的造福人类。
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